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阿胶显微鉴定 中药鉴定学的基础理论

admin 2024-03-07 3
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  1. 中药鉴定学的基础理论
  2. 理化鉴别应该注意什么
  3. 植物内生真菌的鉴定方法步骤有哪些

一、中药鉴定学的基础理论

鉴定中药的品种和质量,制订中药标准,寻找和扩大新药源的应用学科。“保质寻新,整理提高”

1.1鉴定中药的品种质量

1、品种中药中泛指物种,物种不同、成分不同、疗效不同。一定品种的中药,是中医治病的物质基础。”虽有良医而药为伪药,则良医无济于事”,影响质量的首要因素。以假充真 1982年陕西省对县以上药材系统523个单位调查,全省“伪品”26种,混淆品、误用品143种,35个县销售的巴载天是羊角藤,22个县的乌梅均为苦李子和山杏。

1995年元月,我们在汉西收到十九种混淆品药材标本,包括金钱白花蛇(2种)、丹皮、土茯苓、五灵脂、前胡等。

多源现象石斛本属10余种

大黄同属 3种

川贝母同属 4种

品种混淆大黄泻热通便,治疗急腹症效好,但一段时间发现毫无疗效,延误病情。1980年对陕西种植大黄调查,30%面积是波叶大黄,有一个地区全是波叶大黄,大黄属波叶组有抗菌作用但不含泻下成分番泻叶甙。

半夏商品有半夏和水半夏,水半夏无止呕作用。

天南星为天南星属植物的块茎,但半夏属虎掌南星治宫颈癌有效,商品称虎掌南星。

地区习惯用药产生同名异物、同物异名现象。

全国海风藤—————胡椒科风藤和石楠藤

湖北

胡椒科风藤和石楠藤——称作“岩香藤”

夹竹桃科络石藤————称作“石楠藤”

桑科霹雳———————称作“络石藤”

松萝科松萝——————称作“海风藤”物种的本质具有二重性,它既存在又不存在,一方面按形态和生殖的不连续性标准划分的种在自然界有一定普遍性,另一方面至今还没有一个把所有有机体都划分成统一的生物学单位的不连续性标准;种是又间断又连续的,连续的部分发生在种和种的交叉处,变异是多元化的,中间过渡的。

在生态环境改变的情况下品种也发生变化,优劣是量变,真伪是质变。

4、质量:地道药材品种退化、有效成分含量、杂质和有毒物含量、霉变程度。

地理变化:内蒙黄芪栽培在河北,分枝多,柴性大,甜味低。

生态变化:柴胡栽培,主根小,须根多,柴性大,显微结构改变。

不当加工:苦参水泡切制——提不出苦参碱

伪制假药:

五味子提取了浸膏;

金银花粘附杂质40%

海金砂含砂——30%

没药含树皮、砂石要求30~50% 1)显微鉴定

针对含有中药材粉末的成方制剂,借助显微镜观察检品种是否含有各组分中药材的粉末。

2)理化鉴定

对待检中成药中主要药物的有效成分进行光谱或色谱分析,检验是否含有其有效成分及含量的多少。 1)本草考证,理清源流

几千年来,我们积累了三千多种中药的宝贵药学史料,它是指导现代用药的基础。但古代文献浩如烟海,有些又难免出错,需要本草考证及研究。

虎掌和南星纲目上为一物,根据调查,虎掌为半夏属掌叶半夏的块茎,含多量生物碱,为治疗宫颈癌的南星品种;天南星为天南星属天南星、东北天南星、异叶天南星的块茎阿胶回收

2)整理品种,澄清混乱(一物一名)

我国幅员辽阔,品种繁多,各地用药习惯和名称不尽相同,同名异物,同物异名现象严重,亟待整理。

例贯众来源6科 35种

东北绵马贯众含绵马酸类杀虫效好

中南紫萁贯众含促脱皮甾酮,促进代谢

又如金钱草、连钱草、广金钱草等,分别以不同药材名入药。

3)研究调查,继承发展。参考本草,不唯本草,不以本草为唯一尺度

青蒿:菊科青蒿和黄花蒿,青蒿不含青蒿素,90典删去

茵陈:茵陈传统用苗,但花蕾期利胆有效成分6.7–二甲氧基香豆素和茵陈色酮等含量高,现茵陈蒿与茵陈(苗)同入药。求同存异,现代与传统共存,新苗与老茎共存,共同发展。 1、《药品管理法》

首次 1984.9.20颁布 1985.7.1实施

2001.2.28修订 2001.12.1实施

2、中药质量标准

①中药标准含义:

是国家对中药质量及其检验方法所作的技术规定,是中药生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。

②制定原则:安全有效、技术先进、经济合理

③适用范围:新中药材、新中成药、老药再评价

④标准和政策

1994年卫生部药政局《中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)》

1999年国家药品监督管理局《中药新药研究的技术要求》

2002年12月1日实施 SFDA《药品注册管理办法》

现阶段我国中药材及中药制剂的质量控制,主要依据《中华人民共和国药典》(一部)规定的常规方法进行,只是部分药材和制剂有1个或数个指标成分的含量测定方法。从目前情况看,仅靠这些方法在许多情况下还不能达到较好控制中药质量的目的,如在使用已批准生产的中药注射剂中常有产生不良反应的现象,这与制剂质量控制方法不规范,从而造成制剂质量不稳定有密切关系。

中药指纹图谱具有整体、宏观和模糊分析等特点,可以通过对中药整体特性的描述,采取适当模糊的处理方式,达到整体质量控制的目的。

以指纹图谱作为质量控制方法已成为目前的国际共识。为实现中药质量标准现代化并与国际接轨,国家食品药品监督管理局已下发了中药指纹图谱研究要求,首先要求对中药注射剂进行指纹图谱研究,并正在抓紧进行指纹图谱库的建立工作,以逐步实现中药材、中成药质量标准现代化。

中药质量控制方法研究的必然模式:将全成分指纹图谱和效标成分定性定量测定相结合,建立起符合中医用药特色规律的中药系列质量控制统一智能方法系统. 1.4.1中药资源

4.1天然资源

(1)品种丰富

据中国药材总公司历时10年(1984~1994)的调查表明,我国药用植物、动物12807种。其中药用植物11 146种(约占87%),药用动物1581种(约占12%),药用矿物80种(占不足1%)

(《中药大词典》1977,5800~6000种,植物5000)

320种大宗植物药、29种动物药,总蕴藏量850万吨,野生资源是最宝贵的资源。

甘草、麻黄、独活、冬虫夏草来自野生植物

蟾酥、斑蝥、蜈蚣、蝉蜕来自野生动物

石膏、芝硝、朱砂、自然铜来自天然矿物

(2)发现了原来完全依靠进口的野生资源如胡黄连、马钱子、安息香、沉香、广木香、阿魏

4.2中药生产

各地常规经销品种600种,家种大宗药材150种,可提供的种植面积480万亩,年产量30-35万吨。

(1)进口引种成功砂仁、肉桂、丁香、广木香、诃子、豆蔻阿胶多钱

(2)蛤蚧、金钱白花蛇,梅花鹿、全蝎、珍珠养殖成功。

(3)产量超万吨的有当归、茯苓、地黄、山药等。

(4)合成中药:冰片、人工牛黄、人工培育牛黄。

4.3地道药材天时、地利、人力(家种+野生)

内蒙:黄芪、甘草

吉林:人参、鹿茸

甘肃:当归

广西:蛤蚧枳壳

青海:大黄

江苏:薄荷

宁夏:枸杞

安徽:丹皮、芍药

云南:三七、黄连

广东:砂仁、槟榔、益智、巴戟天

河南:山药、牛膝、红花、地黄、菊花

浙江:玄参、浙贝、麦冬、杭菊、郁金、延胡索、白芍、白术

四川:黄连、附子、川贝、川芎、川乌、川黄柏被海内誉为“新三珍”的12种药用动物十分走俏。

在香港:“新三鸡”(乌骨鸡、珍珠鸡、七彩山鸡)每只160港元。

新三鸟(鹧鸪、鹌鹑、肉鸽)每只40港元。

新三龟(草龟、金钱龟、金头龟)每公斤300、950、650元。

珍珠属于传统养殖业。

我国出口的药用营养型动物有乳鸽、甲鱼、黄鳝、泥鳅、鳜鱼、墨鱼、草鱼等近百种,尤其活甲鱼、金钱龟、桂花鱼、活黄鳝、活泥鳅等。原因:一是动物类药材需求急剧增长,二是野生药用动物资源日趋枯竭,标志养殖药用动物的黄金时期到来。

据行家预测,今后较长时期营养型药用动物价挺货紧,大力发展药用动物前景广阔。 1、以亲缘关系为线索,根据生物科属亲缘相近,一般含有近似成分的规律,寻找类似疗效的中药

进口阿魏、马钱子、沉香——国内

东北满山红(兴安杜鹃)治气管炎,西北小叶枇杷(烈香杜鹃)广东紫花杜鹃,疗效类似;

贝母属,新疆贝母、伊黎贝母、平贝母、湖北贝母均润肺平喘。

人参、三七、西洋渗、珠子参含人参皂甙;(还有非人参属的胶股兰)

湖北麦冬,短葶山麦冬多糖和皂苷含量与麦冬相近,但抗缺氧和免疫功能与麦冬相同或更优一筹,“山麦冬”进入95以后的药典。

2、以有效成分为线索

薯蓣皂甙元——薯蓣属穿龙蓣薯、黄姜、粉萆薢(粉背薯蓣)尚有绵萆薢和福州薯蓣。

芸香科黄柏属、毛茛科唐松草属、小檗科小檗属均可作小檗碱的资源植物。

岩白菜素为紫金牛科紫金牛中所含有的镇咳成分,该成分首次发现于虎耳草科岩白菜中,后从虎耳草科筛选,发现落新妇属含量较多。

青黛——菘蓝、蓼蓝、马蓝叶制成

3、以药理和临床疗效为线索

五味子、垂盘草等

4、扩大药用部位

乌龟腹甲(龟板)——背甲+腹甲(龟甲)

5、老药新用

丹参、川芎、葛根、山楂、三七、银杏叶——心血管疾病

6、人工栽培、养殖

野转家射干、金钱白花蛇、鹿、麝、蜈蚣、蝎、土鳖虫。

7、人工合成,代用品研究

人工牛黄、体外培育牛黄——天然牛黄

新阿胶——驴皮胶

8、组织培养、生物工程(生物技术):紫杉醇地大物博、物产丰富、品种繁多

数量减少迅速,种群繁殖困难,濒危品种增加。

全球性原因:热带森林破坏严重(马达加斯加,90%森林被毁),20年前地球上每天消失一个物种,今天每小时消失一个物种。

阿胶显微鉴定 中药鉴定学的基础理论

地区性原因:

1)生态环境破坏严重,人口↑耕地↓沙化↑水土↓

57~86年,790万亩/年↓,937万亩/1993年↓(一个青海省耕地)

人口/1600万/年,澳大利亚1480万,3.5倍青海省人口

2)野生动植物保护意识差,法制不健全。

海洋动物(鲸、海豹等)限捕,陆地野生动物一般禁捕。

我国野生药用动物大量捕杀,熊↓、虎↓、蛇类↓、麝↓

一级珍稀动物鼋当鳖卖(晴川饭店94.8购鼋80公斤,置冰库内)

3)不科学的滥采滥伐

野生珍稀植物在未大量栽培前,不得进入制药工业应用(保护企业、保护植物)。

相关课程:中药资源学,药用植物学,中药拉丁语,中药商品学......

中药鉴定学是一门重要的学科,在各类考试中也占有很重要的地位;在中药学专业的本科阶段,中药鉴定学占6学分,分两个学期;执业药师资格考试、卫生专业资格考试的考试科目中都有中药鉴定学。因此,学好中药鉴定是必要

二、理化鉴别应该注意什么

注意实验现象要写完整,要从整个仪器分析,而且不能写出物质的名称。

熟记实验目地以及实验原理(即方程式),如果有计算题就得注意物质是否为纯净物才能代入方程式。而猜想就要根据实验目地去写,步骤要完整,记住取样,结论也要根据实验目地。

常用的理化鉴定方法

(一)物理常数的测定:

相对密度、旋光度、折光率、硬度、粘稠度、沸点、凝固点、熔点-主要针对挥发油、油脂类、液体类药物(蜂蜜)和加工类(阿胶)。

(二)一般理化鉴别:

1.化学定性分析:利用药材中的化学成分能与某些试剂产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应来鉴别中药的真伪。阿胶燕窝

2.微量升华:在显微镜下观察其结晶形状、颜色及化学反应作为鉴别特征。

3.荧光分析:某些化学成分,在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光性质进行鉴别。

4.显微化学分析:将中药粉末、切片或浸出液,置于载玻片上,滴加某些化学试剂使产生沉淀、结晶或特殊颜色,在显微镜下观察进行鉴定的一种方法。

三、植物内生真菌的鉴定方法步骤有哪些

来源鉴定、性状鉴定、显微鉴定及理化鉴定等方法。

(一)来源鉴定法

又称基原鉴定法,是应用植(动、矿)物分类学的知识,对中药的来源进行鉴定,确定其正确的学名,以保证应用品种准确无误。

1.来源鉴定的内容:包括原植(动)物的科名、植(动)物名、拉丁学名、药用部位,矿物药的类、族、矿石名或岩石名。

2.原植物鉴定的步骤:①观察植物形态;②核对文献;③核对标本。

中药的原植物鉴定,除经典分类学方法外,还可使用化学分类学、细胞分类学、数值分类学、DNA分类学方法和技术。

(二)性状鉴定法

就是用眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的方法来鉴别药材的外观性状,这些方法积累了丰富的传统鉴别经验,具有简单、易行、迅速的特点。性状鉴定的内容包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断面的特征、气、味、水试、火试等。

1.药材:

⑴形状:药材的形状与药用部位有关,每种药材的形状一般比较固定。

⑵大小:指药材的长短、粗细(直径)和厚度。

⑶色泽:药材的颜色与成分有关,颜色是否符合要求,是衡量药材质量好坏的重要因素之一。一般应在自然光下观察药材的颜色,如用两种色调复合描述色泽时,应以后一种色调为主色。

⑷表面特征:指药材表面是光滑还是粗糙,有无皱纹、皮孔、鳞片、毛茸或其它附属物等。

⑸质地:指药材的轻重、软硬、坚韧、疏松(或泡松)、致密、黏性、粉性、油润、角质、绵性、柴性等特征。

⑹断面特征:包括自然折断面和横切面。

⑺气:“气”是由于药材含有挥发性物质的缘故,也是药材的重要鉴定特征之一。

⑻味:药材的味感是由其所含的化学成分决定的,每种药材的味感是比较固定的。味感也是衡量药材品质的标准之一。

⑼水试:有些药材放入水中,能产生特殊的现象,如沉浮、溶解情况、颜色、透明度、有无黏性、膨胀度、旋转与否及有无荧光等。

⑽火试:有些药材用火烧之,能产生特殊的香气或臭气,会有颜色、烟雾、闪光或响声等现象出现,可据此鉴别其真伪甚至优劣。

三)显微鉴定法

是利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状以及内含物的特征,矿物的光学特性,以及利用显微化学方法,确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布,用以鉴定药材的真伪和纯度甚至品质,以及对中成药是否按处方规定投料进行鉴定。

1.显微制片方法

包括有横切片或纵切片、表面制片、粉末制片、解离组织片、花粉粒与孢子制片、磨片制片、含粉末药材的制剂显微制片等。

2.植物细胞壁和内含物的鉴别

3.显微测量

目镜测微尺先用镜台测微尺标化,然后在显微镜下测量细胞及细胞内含物的大小。通常是在高倍物镜下进行测量,但欲测量较长的纤维、非腺毛等的长度时,则在低倍物镜下测量,记录最大值与最小值。

4.显微常数测定

常见的显微常数主要有用于叶类鉴别的气孔数、气孔指数、栅表比、脉岛数和脉端数等。这些显微常数常因植物种类不同而异,而同种植物则较为恒定,对于叶类、某些带叶的全草类和花类药材的品种鉴定有重要意义。

5.常用封藏试液

⑴蒸馏水、稀甘油:适用于观察淀粉粒、油滴、树脂等细胞内含物及细胞壁的颜色。

⑵甘油醋酸试液:使淀粉粒不膨胀,特别适宜淀粉粒的观察与显微测量。

⑶水合氯醛试液:可使皱缩的细胞膨胀;可溶解多种色素,如叶绿素及树脂、淀粉粒、蛋白质、菊糖、挥发油,而各种晶体不溶解;有清净、透明作用,使细胞、组织透明,便于观察细胞形状和组织构造及细胞内含的各种结晶体。

6.扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用

⑴扫描电子显微镜:分辨率高,可达3nm,放大倍数一般可达几十万倍,图像富有立体感。

⑵偏光显微镜:主要用于观察和分析矿物类中药的光学性质,也可用于研究动物和植物类中药的组织及细胞内含物,如淀粉粒、草酸钙簇晶等。对于透明矿物,一般使用透射光源的偏光显微镜;对于不透明矿物则使用放射光源的偏光显微镜。

(四)理化鉴定法

1.物理常数的测定

包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油类、油脂类、树脂类、液体类药(如蜂蜜等)和加工品类(如阿胶等)药材的真实性和纯度的鉴定,具有特别重要的意义。

2.一般理化鉴别

⑴化学定性分析:利用药材中的化学成分能与某些试剂产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应来鉴别中药的真伪。

⑵微量升华:利用中药中所含的某些成分,在一定温度下能升华的性质获得升华物,在显微镜下观察其结晶性状、色泽,或取升华物加试液观察反应。

⑶荧光分析:利用中药中所含的某些化学成分在紫外光或常光下能产生一定颜色的荧光的性质进行鉴别。紫外光灯的波长为365nm,如用短波(254~265nm)时应加以说明。

⑷显微化学分析:将药材的切片、粉末或浸出物等置于载玻片上,加某些化学试剂后产生沉淀或结晶,在显微镜下观察其形状和颜色进行鉴别。利用显微和化学方法确定中药有效成分在中药组织构造中的部位,称为显微化学定位试验。

⑸泡沫指数和溶血指数:利用皂苷的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红血球的性质,可测定含皂苷类成分药材的泡沫指数或溶血指数作为质量指标。

3.检查

⑴水分测定法:2005年版《中国药典》水分测定法有四种,即烘干法、甲苯法、减压干燥法和气相色谱法。

⑵灰分测定法:2005年版《中国药典》灰分测定法包括总灰分测定法和酸不溶性灰分测定法。

⑶膨胀度的测定:膨胀度是药品膨胀性质的指标,系指按干燥品计算,每1g药品在水或其它规定的溶剂中,在一定的时间与温度条件下膨胀后所占有的体积(ml)。主要用于含黏液质、胶质和半纤维素类的天然药品。

⑷酸败度:是指油脂或含油脂的种子类药材,在贮藏过程中发生复杂的化学变化,产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛、酮类分解产物,因而出现臭味,影响药材的感观性质和内在质量。

⑸色度检查:利用比色鉴别法检查药材在贮藏过程中有色杂质的限量,如白术。

⑹有害物质的检查:中药中的有害物质主要有内源性的有害物质和外源性的有害物质。

①内源性的有害物质:

②外源性有害物质:

4.色谱法

⑴薄层色谱法:是用于定性鉴别最多的色谱法之一。

⑵高效液相色谱法

⑶气相色谱法:适用于含挥发油及其它挥发性组分的中药及中成药的分析吃了阿胶

⑷蛋白电泳色谱法:用于动物药、果实种子类及根茎类等含蛋白质及氨基酸的药材的真伪鉴别。

⑸高效毛细管电泳

5.分光光度法

包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法和原子吸收分光光度法。常用波长范围为:200~400nm的紫外光区;400~760nm的可见光区;2.5~25um(按波数计为4000~400cm-1)的红外光区。

6.色谱-光谱联用仪分析法

7.浸出物测定

对某些中药的有效成分尚未清楚或尚无精确定量方法的中药,一般可根据已知成分的溶解性质选用溶剂进行浸出物的测定。通常选用水、一定浓度的乙醇(或甲醇)、乙醚作浸出物测定。有冷浸法和热浸法。测定前供试品需粉碎,使能过二号筛。

8.含量测定

⑴含量测定方法:既有经典分析方法(容量法、重量法等)又有现代仪器分析法(如紫外-可见分光光度法、气相色谱法、薄层扫描法、高效液相法等)。

⑵挥发油含量测定方法有两种:①甲法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油;②乙法适用于测定相对密度在1.0以上的挥发油。

(五)新技术和新方法简介

1.DNA分子遗传标记技术

2.中药指纹图谱鉴定技术

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